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拓展液相色譜溶劑效應(yīng):解析色譜峰異常并尋找解決辦法

更新時(shí)間:2023-07-17      點(diǎn)擊次數(shù):1429

液相色譜的溶劑效應(yīng)是指樣品在溶解時(shí)與稀釋劑、流動(dòng)相之間的相互作用,導(dǎo)致色譜行為異常的現(xiàn)象。傳統(tǒng)理解中,溶劑效應(yīng)通常用來解釋樣品在流動(dòng)相中的溶解度大于在純樣品溶劑中時(shí)所造成的色譜峰變形。例如,當(dāng)用100%純乙腈溶解樣品,并注入乙腈—水(18:82)的反相色譜系統(tǒng)中,會(huì)觀察到峰分叉或拖尾現(xiàn)象。

然而,這種傳統(tǒng)的理解并不能完整解釋其他由所選稀釋劑導(dǎo)致的色譜峰變形現(xiàn)象,比如樣品在pH 6.8溶出介質(zhì)中取出后,注入某些緩沖鹽—有機(jī)相系統(tǒng)中保留時(shí)間不穩(wěn)定及色譜峰變形的情況。

為了更全面理解和解釋這些現(xiàn)象,我們需要擴(kuò)展溶劑效應(yīng)的概念。具體的擴(kuò)展內(nèi)容如下:

1. 洗脫能力的差異:這是目前一般理解的溶劑效應(yīng),指的是樣品在稀釋劑與流動(dòng)相之間洗脫行為的差異。

2. 電離狀態(tài)的差異:某些藥物活性成分具有離子化的特性,例如成鹽狀態(tài)的藥物如鹽酸達(dá)卡他韋、帕瑞昔布鈉等。這些樣品既存在離子化狀態(tài)也存在非離子化狀態(tài),并且在流動(dòng)相和固定相之間的分配系數(shù)不同。在反相系統(tǒng)中,非離子化狀態(tài)更容易與固定相結(jié)合,因此保留時(shí)間較長,而離子化狀態(tài)則更親和于流動(dòng)相,導(dǎo)致保留較弱。如果樣品在稀釋劑中的電離狀態(tài)與流動(dòng)相的電離狀態(tài)存在顯著差異,就可能出現(xiàn)保留時(shí)間不穩(wěn)定及色譜峰變形的現(xiàn)象。為解決這個(gè)問題,可以嘗試使用流動(dòng)相稀釋樣品溶液、減少進(jìn)樣量或增加流動(dòng)相的緩沖能力。

3. 溶解性的差異:在與參比制劑的溶出曲線對(duì)比試驗(yàn)中,經(jīng)常會(huì)在溶出介質(zhì)中加入表面活性劑。這時(shí),有時(shí)會(huì)觀察到樣品的保留時(shí)間不穩(wěn)定。這也是由于樣品在稀釋劑中與固定相的分配系數(shù)與流動(dòng)相與固定相的分配系數(shù)差異較大導(dǎo)致的。解決辦法可以是在流動(dòng)相中加入相同的表面活性劑,或調(diào)整有機(jī)相的比例。

溶劑效應(yīng)的理解可以擴(kuò)展為樣品中某些組分在稀釋劑與流動(dòng)相之間的狀態(tài)差異導(dǎo)致的色譜行為異常。為解決這類問題,可以采取稀釋樣品溶液的流動(dòng)相、減少進(jìn)樣量或增加流動(dòng)相緩沖能力等方法。雖然液相色譜中可能還存在其他差異,但由于篇幅限制,未一一列舉。總之,可以參照上述情況進(jìn)行解釋并尋找解決辦法。


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